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DB45/T 1006-2014《牛轮状病毒的检测 半巢式反转录聚合酶链反应（semi-nested RT-PCR）法》基本信息
标准号：DB45/T 1006-2014
中文名称：《牛轮状病毒的检测 半巢式反转录聚合酶链反应（semi-nested RT-PCR）法》
发布日期：2014-05-25
实施日期：2014-06-25
发布部门：广西壮族自治区质量技术监督局
DB45/T 1006-2014《牛轮状病毒的检测 半巢式反转录聚合酶链反应（semi-nested RT-PCR）法》介绍
DB45/T 1006-2014《牛轮状病毒的检测 半巢式反转录聚合酶链反应（semi-nested RT-PCR）法》是一项由广西壮族自治区质量技术监督局发布的专业标准。
一、标准概述
DB45/T 1006-2014标准规定了一种半巢式反转录聚合酶链反应法（semi-nested RT-PCR）用于检测牛轮状病毒。该方法具有操作简便、灵敏度高、特异性强等特点，适用于牛轮状病毒的快速筛查和定量检测。
二、标准适用范围
本标准适用于牛轮状病毒的检测，包括病毒的快速筛查、定量检测以及病毒基因的克隆和序列分析。该标准还适用于其他类似病毒的检测，如猪轮状病毒、羊轮状病毒等。
三、标准主要内容
1、术语和定义：标准对牛轮状病毒、半巢式反转录聚合酶链反应等专业术语进行了明确的定义，为后续内容的理解奠定了基础。
2、试剂和材料：详细列出了进行半巢式反转录聚合酶链反应所需的试剂和材料，包括RNA提取试剂、反转录酶、DNA聚合酶等。
3、仪器设备：规定了进行实验所需的仪器设备，如PCR仪、凝胶电泳仪、紫外凝胶成像系统等。
4、样品的采集与处理：对样品的采集、保存和处理方法进行了详细说明，确保样品的质量和实验的准确性。
5、实验步骤：详细介绍了半巢式反转录聚合酶链反应的实验步骤，包括RNA的提取、反转录、半巢式PCR扩增、凝胶电泳分析等。
6、结果的判定：对实验结果的判定方法进行了规定，包括阳性、阴性和可疑结果的判定标准。
7、质量控制：强调了实验过程中的质量控制，包括对照样品的设置、重复实验、数据记录等。
8、数据记录和报告：规定了实验数据的记录和报告格式，确保实验结果的可追溯性和可比性。
四、标准的意义
DB45/T 1006-2014标准的发布和实施，对提高牛轮状病毒检测的准确性和可靠性具有重要意义。它为牛轮状病毒的检测提供了一种标准化的方法，有助于减少不同实验室之间的检测结果差异。半巢式反转录聚合酶链反应法具有较高的灵敏度和特异性，能够更准确地检测出病毒的存在。该标准还有助于提高病毒基因的克隆和序列分析的准确性。
DB45/T 1006-2014《牛轮状病毒的检测 半巢式反转录聚合酶链反应（semi-nested RT-PCR）法》是一项具有指导意义的专业标准，为牛轮状病毒的检测提供了标准化的方法和流程。
