标准详情
NY/T 2840-2015《猪细小病毒间接ELISA抗体检测方法》基本信息
标准号:NY/T 2840-2015
中文名称:《猪细小病毒间接ELISA抗体检测方法》
发布日期:2015-10-09
实施日期:2015-12-01
发布部门:中华人民共和国农业部
NY/T 2840-2015《猪细小病毒间接ELISA抗体检测方法》介绍
中华人民共和国农业部于2015年10月9日发布了NY/T 2840-2015《猪细小病毒间接ELISA抗体检测方法》标准,并于2015年12月1日正式实施。
一、标准概述
NY/T 2840-2015标准规定了猪细小病毒间接ELISA抗体检测方法,包括样品的采集、处理、检测试剂的配制、操作步骤、结果判定等方面的具体要求。该标准适用于猪细小病毒抗体的检测,对于猪细小病毒病的诊断和防控具有重要意义。
二、样品采集与处理
样品采集是检测工作的基础,标准要求采集猪只血清作为检测样品。在采集过程中,应使用无菌采血器,避免污染,并在采集后尽快进行血清分离。血清分离后,应将血清样品保存在-20℃以下,以保证样品的稳定性。
三、检测试剂配制
标准对检测试剂的配制提出了具体要求。需要配制包被液、洗涤液、稀释液等试剂。在配制过程中,应严格按照标准规定的配方和比例进行操作,确保试剂的准确性和一致性。还应根据实际情况配制阳性对照血清和阴性对照血清,以评估检测结果的可靠性。
四、操作步骤
1、包被:将配制好的包被液加入到ELISA板中,使抗原均匀分布在板孔中,然后进行固定。
2、稀释:将待测血清样品进行适当稀释,以适应ELISA检测的要求。
3、加样:将稀释后的血清样品、阳性对照血清和阴性对照血清分别加入到ELISA板的相应孔中。
4、孵育:将ELISA板在恒温条件下孵育,使抗原和抗体充分结合。
5、洗涤:去除未结合的样品和试剂,减少非特异性反应。
6、加酶标二抗:将酶标记的二抗加入到板孔中,与抗体结合。
7、显色:加入底物,使酶催化底物产生颜色反应。
8、终止:加入终止液,终止酶促反应,使颜色反应稳定。
9、测定:使用酶标仪测定各孔的吸光度,计算样品的抗体水平。
五、结果判定
标准对结果判定提出了明确要求。根据测定的吸光度值,结合阳性对照血清和阴性对照血清的吸光度,判断样品是否含有猪细小病毒抗体。若样品的吸光度值介于阳性对照血清和阴性对照血清之间,则需进行复检,以确保结果的准确性。
NY/T 2840-2015《猪细小病毒间接ELISA抗体检测方法》标准的发布和实施,为猪细小病毒病的诊断和防控提供了科学的依据和方法。通过严格执行该标准,可以有效提高猪细小病毒病的检测准确性,降低误诊和漏诊的风险。