elisa检测的是什么

来源：企来检时间：2024-08-28 浏览：218

ELISA，即酶联免疫吸附测定，这种检测方法广泛应用于定量分析各种样品类型中的特定抗原，包括肽、蛋白质、抗体或小分子。本文将详细介绍ELISA检测的原理、应用领域以及操作步骤。

一、ELISA检测什么

ELISA检测技术基于抗原-抗体反应的原理。在实验过程中，首先将待测抗原或抗体固定在固相载体（通常是塑料板）上，然后加入特异性的抗体或抗原，通过抗原-抗体特异性结合形成复合物。加入酶标记的二抗体，与复合物结合，形成酶-抗体-抗原复合物。加入底物，使酶催化底物产生颜色变化，通过光度计测定吸光度，从而计算出待测物质的浓度。

ELISA检测方法是一种高度敏感和特异性的生物化学分析技术，能够对多种生物样品中的特定抗原进行精确的定量分析。这些样品类型包括但不限于血液、血清、血浆、尿液、脑脊液、细胞培养上清液以及组织匀浆等，覆盖了从临床诊断到食品检测，再到环境监测等领域。

ELISA检测的优点是检测的灵敏度可达皮克级别，适用于低丰度物质的检测。ELISA操作步骤相对简单，易于标准化和自动化。相较于其他检测方法，ELISA的成本较低，适合大规模筛查。缺点是由于抗体的交叉反应，ELISA检测可能存在一定的特异性问题。ELISA操作过程中的洗涤、孵育等步骤可能引入操作误差，影响结果的准确性。

二、ELISA检测的操作步骤

1、样品准备：根据实验目的，选择合适的样品类型，如血清、尿液、组织匀浆等，并进行适当的处理和稀释。

2、固相载体的准备：将待测抗原或抗体固定在固相载体上，通常使用96孔板，通过吸附或共价键合的方式实现固定。

3、一抗的孵育：将固相载体与特异性的一抗孵育，使抗原-抗体特异性结合。

4、洗涤：去除未结合的一抗，通常使用PBS-T缓冲液进行洗涤。

5、二抗的孵育：加入酶标记的二抗，与一抗-抗原复合物结合。

6、再次洗涤：去除未结合的二抗，同样使用PBS-T缓冲液进行洗涤。

7、底物的加入：加入底物，使酶催化底物产生颜色变化。

8、显色和测定：在一定时间后，使用光度计测定各孔的吸光度，根据标准曲线计算出待测物质的浓度。

三、ELISA检测的应用领域

1、生物医学研究：ELISA技术在生物医学研究中具有广泛的应用，如检测细胞因子、激素、酶等生物活性物质的表达水平，为疾病机理研究提供重要信息。

2、临床诊断：ELISA检测在临床诊断中发挥着重要作用，如检测血清中的抗体或抗原，用于传染病、自身免疫病和肿瘤等疾病的诊断。