SN/T 1666-2005《水稻条纹病毒、水稻矮缩病毒、水稻黑条矮缩病毒的检测方法 普通RT-PCR方法和实时荧光RT-PCR方法》

SN/T 1666-2005《水稻条纹病毒、水稻矮缩病毒、水稻黑条矮缩病毒的检测方法 普通RT-PCR方法和实时荧光RT-PCR方法》基本信息

标准号：SN/T 1666-2005

中文名称：《水稻条纹病毒、水稻矮缩病毒、水稻黑条矮缩病毒的检测方法 普通RT-PCR方法和实时荧光RT-PCR方法》

发布日期：2005-09-30    

实施日期：2006-05-01

发布部门：中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局    

提出单位：国家认证认可监督管理委员会    

归口单位：国家认证认可监督管理委员会    

起草单位：中华人民共和国湖北出入境检验检疫局、中国检验检疫科学研究院

起草人：朱金国、陈红运、朱水芳、李献坤、黄志强、陈白莙、姜金林、向俨    

中国标准分类号：B16植物检疫、病虫害防治

国际标准分类号：65.020农业和林业

SN/T 1666-2005《水稻条纹病毒、水稻矮缩病毒、水稻黑条矮缩病毒的检测方法 普通RT-PCR方法和实时荧光RT-PCR方法》介绍

中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局于2005年发布了《水稻条纹病毒、水稻矮缩病毒、水稻黑条矮缩病毒的检测方法 普通RT-PCR方法和实时荧光RT-PCR方法》(SN/T 1666-2005)标准。该标准自2006年5月1日起正式实施。

一、标准适用范围

SN/T 1666-2005标准主要针对水稻条纹病毒、水稻矮缩病毒和水稻黑条矮缩病毒这三种病毒的检测。这三种病毒是水稻生产中常见的病毒性病害，严重影响水稻的产量和品质。通过该标准的实施，可以有效提高病毒病的早期诊断和防治效果。

二、检测方法概述

SN/T 1666-2005标准规定了两种检测方法：普通RT-PCR方法和实时荧光RT-PCR方法。这两种方法都是基于反转录聚合酶链反应（RT-PCR）技术，通过检测病毒RNA的存在来判断病毒的感染情况。

1、普通RT-PCR方法：该方法通过反转录病毒RNA为cDNA，然后通过PCR扩增特定的病毒基因片段，最后通过凝胶电泳观察扩增产物来判断病毒的存在。

2、实时荧光RT-PCR方法：相较于普通RT-PCR方法，该方法在PCR过程中加入荧光标记，通过实时监测荧光信号的变化，可以定量分析病毒的数量。

三、样品采集与处理

标准对样品的采集和处理提出了具体要求，包括：

1、样品采集：要求在水稻生长的不同阶段，选择具有代表性的植株进行病毒检测。

2、样品处理：对采集的样品进行适当的处理，如研磨、提取RNA等，以便于后续的检测工作。

四、实验操作步骤

1、反转录：将病毒RNA逆转录为cDNA。

2、PCR扩增：根据病毒基因序列设计特异性引物，进行PCR扩增。

3、凝胶电泳：对扩增产物进行凝胶电泳，观察条带情况。

4、荧光定量：在实时荧光RT-PCR方法中，通过荧光信号的变化实时监测病毒数量。

五、结果判断与报告

1、结果判断：根据凝胶电泳或荧光信号的强度，判断病毒的感染情况。

2、报告编制：实验结果需要按照规定的格式进行记录和报告，以便于后续的分析和应用。

六、质量控制

1、阳性对照：在实验过程中加入已知病毒的阳性对照样品，以验证实验体系的有效性。

2、阴性对照：加入不含病毒的阴性对照样品，以排除实验过程中的污染。

SN/T 1666-2005标准的发布和实施，为水稻病毒病的检测提供了科学、规范的方法，有助于提高病毒病的早期诊断和防治效果，保障水稻生产的安全和可持续发展。

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